DEAE-Sephadex A-50 柱層析純化免疫球蛋白原理 DEAE-sephadexA-50 柱層析是離子交換層析的一種。 (四) 注意事項(xiàng) 1.柱的選擇：從理論上說(shuō)，只要柱足夠長(zhǎng)，就得獲得理想的分辨率，但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān)，柱長(zhǎng)增加使流速減慢，峰變寬，分辨率降低。柱的直徑增加，使液體流動(dòng)的不均勻性增加，分辨率明顯下降。 2.純化過(guò)程必須嚴(yán)格控制脫緩沖液的PH及離子強(qiáng)度。樣品與A-50凝膠必須用洗脫緩沖液*平衡后，才能進(jìn)行柱層析。 3.所裝的柱床必須表面平整，無(wú)溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝。 4.洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速，且勿過(guò)快。 5.上樣的體積要小，濃度不宜過(guò)高。 6.加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中，嚴(yán)防柱面變干。 |
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