回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%，這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系，說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測(cè)定, 樣品水中含有無機(jī)氯 20 mg/L, 取 100mL 被測(cè)水樣品, 加入 0.1mL 濃度為 10mg/mL 的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品, 測(cè)定時(shí)忽略體積變化, 如果測(cè)定出樣品中無機(jī)氯為 2.98mg/L, 則認(rèn)為回收率為 98%。對(duì)于定量檢測(cè)來說，主要還是一個(gè)準(zhǔn)確度的驗(yàn)證。
相對(duì)回收率可能會(huì)高于滿百的，如果只是說“損失程度”，其實(shí)是不準(zhǔn)確的。應(yīng)該說，回收率越接近滿百，說明這個(gè)試劑盒的準(zhǔn)確度越高。
elisa試劑盒步驟如下：
1.首先用包被緩沖液將已知抗原稀釋到1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜;
2.第二日日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;
4.(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育30-60分鐘，洗滌; 最后一遍用DDW洗滌。
6.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
7.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
8.結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
操作以上步驟完畢后，就可以知道結(jié)果了。
